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构建预血管化细胞膜片及血管形成相关因子的表(5)
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摘要：综上所述，预血管化细胞膜片血管形成相关因子表达出现显著变化，这些分子可能参与了新生血管形成，这些发现可能有助于理解其机制，影响机制需要进
综上所述，预血管化细胞膜片血管形成相关因子表达出现显著变化，这些分子可能参与了新生血管形成，这些发现可能有助于理解其机制，影响机制需要进一步深入研究。
图 1 ｜兔骨髓间充质干细胞形态(×100)Figure 1 ｜Morphology of rabbit bone marrow mesenchymal stem cells (×100)图注：A 为原代细胞，贴壁生长，培养3 d 时散在分布，呈梭形或不规则形状；B-D分别为第1，2，3 代细胞，贴壁生长，细胞多呈纺锤形，呈平行排列或旋涡状生长
图 2 ｜兔骨髓间充质干细胞表面标志物鉴定Figure 2 ｜Immunophenotype identification of rabbit bone marrow mesenchymal stem cells
图 3 ｜兔骨髓间充质干细胞多向分化能力鉴定(×100)Figure 3 ｜Identification of multipotent differentiation of rabbit bone marrow mesenchymal stem cells (×100)图注：A 为经成骨诱导分化培养基处理，茜素红染色可见细胞具有钙盐沉积；B 为未诱导组，茜素红染色为阴性；C 为经成脂诱导分化培养基处理，油红O 染色可见细胞内出现脂滴；D 为未诱导组，油红O 染色为阴性
图 4 ｜干细胞膜片形态学观察(×100)Figure 4 ｜Morphology of stem cell sheets (×100)图注：A 为经抗坏血酸处理3 d 的骨髓间充质干细胞，细胞密度不断增加，细胞间隙不明，细胞呈梭状，重叠生长；B 为未经抗坏血酸处理3 d 的骨髓间充质干细胞，细胞密度增加幅度小，细胞间密切接触，细胞体积增大；C 为经抗坏血酸处理14 d 的骨髓间充质干细胞，细胞间隙消失、重叠生长，形态难以辨认；D 为未经抗坏血酸处理14 d的骨髓间充质干细胞，细胞单层生长，密切接触，细胞变大、变圆；E 为经抗坏血酸处理14 d 后用无菌镊收集细胞膜片，形成膜片样结构；F 为未经抗坏血酸处理未形成膜片样结构
图 5 ｜干细胞膜片多向分化能力鉴定(×100)Figure 5 ｜Identification of multipotent differentiation of stem cell sheets (×100)图注：A 为经成骨培养基诱导分化的干细胞膜片，茜素红染色可见细胞具有钙盐沉积；B 为未诱导分化的干细胞膜片，茜素红染色阴性；C 为经成脂培养基诱导分化的干细胞膜片，油红O 染色可见细胞内脂滴染成红色；D为未诱导分化的干细胞膜片，油红O 染色阴性
图6 ｜干细胞膜片细胞外基质相关检测Figure 6 ｜Detection of extracellular matrix of stem cell sheet图注：A 为干细胞膜片苏木精-伊红染色，细胞质及细胞外基质染成粉红色，细胞核染成蓝色，细胞复层生长，可见大量细胞外基质(×200)；B 为干细胞膜片与骨髓间充质干细胞细胞外基质Ⅰ型胶原及纤维连接蛋白mRNA 表达，aP＜ 0.05
图7 ｜兔脐静脉内皮细胞形态学(×100)Figure 7 ｜Morphological of rabbit umbilical vein endothelial cells (×100)图注：A-C 分别为兔脐静脉内皮细胞P0、P1、P2 代，细胞贴壁生长，为多角形，单层，当细胞汇合、融合时排列呈“铺路石”样
图8 ｜预血管化细胞膜片与脐静脉内皮细胞形态学观察(×100)Figure 8 ｜Morphology of prevascularized cell sheet group and rabbitumbilical vein endothelial cells group (×100)图注：A1-A3 为预血管化细胞膜片干预3，7，14 d，3 d 时预血管化细胞膜片中的脐静脉内皮细胞发生迁移、重排，7 d 可见细胞排列成条索状结构(箭头示)，14 d 时形成网状结构；B1-B3 为脐静脉内皮细胞单独培养3，7，14 d，随着培养时间的延长，脐静脉内皮细胞单独培养组细胞密度不断增加，形成细胞团，未形成网状结构
图9 ｜预血管化细胞膜片与脐静脉内皮细胞苏木精-伊红染色(×200)Figure 9 ｜Hematoxylin-eosin staining of prevascularized cell sheet group and rabbit umbilical vein endothelial cells group (×200)图注：A1-A3 为预血管化细胞膜片干预3，7，14 d，3 d 时可见细胞排列不均匀，7 d 时可见细胞条索状排列(箭头示)，14 d 见细胞呈网状结构；B1-B3 为脐静脉内皮细胞单独培养3，7，14 d，随着培养时间延长，细胞密度不断增加，形成细胞团，未见条索状、网状结构形成
图10 ｜预血管化细胞膜片与脐静脉内皮细胞CD31 免疫组化(×200)Figure 10 ｜ CD31 immunohistochemistry of prevascularized cell sheet and umbilical vein endothelial cells (×200)图注：A 为预血管化细胞膜片，可见形成血管网状结构；B 为单独培养的脐静脉内皮细胞，未见形成条索状、网状结构
图11 ｜预血管化细胞膜片与脐静脉内皮细胞血管形成相关基因mRNA表达Figure 11 ｜mRNA expression of angiogenesis-related genes of prevascularized cell sheet and umbilical vein endothelial cells图注：A-D 分别为血管内皮生长因子、碱性成纤维细胞生长因子、血管生成素1 与血管生成素2 mRNA 表达； PVCS 为预血管化细胞膜片，RUVECs 为兔脐静脉内皮细胞。aP＜ 0.05
文章来源：《冶金与材料》 网址: http://www.yjyclzz.cn/qikandaodu/2021/0203/732.html